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大家衆所周知,納米銀粉具(jù)有(yǒu)良好的殺菌、抗病毒的效果,而我國(guó)科(kē)研人員近年亦在這方面進行了深入的研究,并取得一定進展。其中(zhōng)大連大學(xué)醫(yī)學(xué)院的尹儉儉先生對納米銀抗3型副流感病毒作(zuò)用(yòng)較具(jù)代表性,以下研究數據及結論均為(wèi)原文(wén)轉載相應的論文(wén)文(wén)獻。
納米銀抗3型副流感病毒作(zuò)用(yòng)及機制研究結果:
1、納米銀對MDCK的毒性作(zuò)用(yòng)及PIV3的毒力 納米銀粉對MDCK作(zuò)用(yòng)的較大無毒質(zhì)量濃度( TC0) 為(wèi) 25 mg /L[8], PIV3 對 MDCK 細胞作(zuò)用(yòng)的 TCID50為(wèi)10-1.35 /mL。當納米銀濃度大于25 mg /L後,則開始抑制MDCK生長(cháng)。納米銀粉對MDCK的毒性作(zuò)用(yòng)主要表現為(wèi)細胞顆粒增多(duō),大小(xiǎo)不均,增殖緩慢,細胞回縮、變圓、成串脫落死亡。納米銀對細胞的毒性作(zuò)用(yòng)随着納米銀溶液質(zhì)量濃度的降低而降低,細胞存活率相應增加。
2、MTT法檢測納米銀對PIV3的抑制作(zuò)用(yòng) 結果表明,納米銀處理(lǐ)組( 直接滅活組,預防給 藥組,**給藥組) 的細胞存活率與病毒對照組相比,差異有(yǒu)統計學(xué)意義( P <0. 01) 。見表1。表1不同組 MTT 檢測結果的比較 x ± s Tab 1 Comparison of MTT assay results in different groups 組别 MTT值細胞存活率/%直接滅活組0.8273 ±0.04 94.81 ±0.02 a 預防給藥組 0.8120 ±0.04 93.05±0.05 a **給藥組 0.7882 ±0.01 90.32±0.02 a 正常細胞組 0.8727 ±0.04 —病毒對照組0.2470±0.05 25.50 ±0.06 納米銀對照組 0.8308 ±0.03 95.21±0.04 F 值 361. 542 332.327 P 值 <0.01 <0.01 a: P <0.01,與病毒對照組比較。
3、免疫熒光法檢測納米銀對PIV3的抑制作(zuò)用(yòng) 待 MDCK 在置有(yǒu)蓋玻片的6 孔培養闆上 層後,将納米銀和 PIV3 作(zuò)不同的處理(lǐ),封片,于倒置 顯微鏡下觀察。如圖1 所示,正常MDCK 組未見特異 性黃綠色熒光,細胞形态正常;病毒對照組和溶劑對 照組( 溶劑與 PIV3 混合組) 中(zhōng), MDCK 均出現了很(hěn)強的特異性黃綠色熒光,細胞腫脹變圓、間隙增大、細胞 死亡或脫落;預防用(yòng)藥組、直接滅活組、**用(yòng)藥組的細胞内特異性熒光均很(hěn)少見,細胞形态變化不大,細 胞稍微回縮,但形态基本正常。
MTT 和免疫熒光的結果表明,納米銀能(néng)明顯抑制 PIV3的複制和子代病毒的合成,對 PIV3 的侵入 有(yǒu)一定的阻斷作(zuò)用(yòng),對 PIV3 及其吸附有(yǒu)破壞作(zuò)用(yòng)。
4、納米銀粉對神經氨酸酶活性的抑制 不同質(zhì)量濃度的納米銀( 75 mg /L和 37.5 mg /L) 分(fēn)别與PIV3 相互作(zuò)用(yòng) 30 min 和 60 min,再孵育 10 min,納米銀對 PIV3 神經氨酸酶活性的抑 制率均高于 80%,而病毒對照組和溶劑對照組的 抑制率均低于 20%( 圖 2) 。神經氨酸酶催化唾液 酸與糖蛋白之間糖苷鍵的水解,協助病毒顆粒穿 過呼吸道黏液和促進子代病毒體(tǐ)脫離于**細 胞[9]。上述結果表明,納米銀可(kě)以通過作(zuò)用(yòng)于 PIV3 神經氨酸酶藥物(wù)靶點來阻斷病毒對細胞的**。
5、納米銀粉對 PIV3 粒子的破壞作(zuò)用(yòng)PIV3 液經透射電(diàn)鏡負染色後,可(kě)觀察到正常形态特征。PIV3 與納米銀相互作(zuò)用(yòng)30min 後,其形态部分(fēn)缺損; 相互作(zuò)用(yòng) 60 min,結構完全被破壞; 作(zuò)用(yòng) 120 min,病毒被破壞成更小(xiǎo)的碎 片,形态已無法觀察。見圖 3。結果表明,納米銀 顆粒可(kě)能(néng)直接破壞 PIV3 的形态和結構。
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